完全長16Sアンプリコンシーケンス

Full-Length 16S Amplicon Sequencing

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完全長16Sアンプリコンシーケンス

 

 

 

■サービス概要

一分子リアルタイムシーケンス(Single-molecule real-time sequencing:SMRT Sequencing)を用いて、全長16S遺伝子メタゲノムシーケンス解析を行うサービスです。

PacBio Sequelを用いたロングリードシーケンスを行うことで、ショートリードシーケンスの影響による解析遺伝子の分断に対するソリューションおよび、マイナーな超可変領域カバーすることが可能となりました。

種レベルでの細菌叢解析をご希望の方に、ご紹介できるサービスとなっております。

 

■サービス仕様

  • シーケンシング:PacBio Sequel(CCSモード)
  • 納品データ:BAMファイル
  • 納品方法:データダウンロード(100 Gb未満)/HDD納品(100 Gb以上)

 

■ライブラリ調製方法

  • SMRTbell Express Template Prep Kit

 

■サンプル要件

  • サンプルの状態:Genomic DNA
  • サンプル量:150 ng以上
  • 濃度:10 ng/µL 以上
  • 液量:15 µL以上
  • 純度:OD260/280 = 1.8~2.0
    サンプルの分解、RNA・タンパク質のコンタミがないこと

 

■納期

  • サンプルQC後 6週間 (解析なしの場合)

 

■データ解析(オプション)

  • データ品質管理:プライマー除去、キメラ濾過、デノイズASV
  • 分類学的解析:分類学アノテーション、分類学レベルごとのバープロット
  • アルファ多様性解析:アルファ多様性指標、アルファ希少度、アルファ群有意性
  • ベータ多様性解析:β多様性指標、β群有意性、主座標分析(QIIME2)
  • 統計学とプロット:配列レベルでの存在量差、分類学レベルでの存在量差、ベン分析(MetaStats等)

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