FastGene™ T4 DNAリガーゼ/ライゲーション キット/2X DNAライゲーションミックス
FastGene™ T4 DNA Ligase/Ligation Kit/2X DNA Ligation Mix
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隣接したDNA鎖の5’-P末端と3’-OH末端をホスホジエステル結合で連結する酵素で、平滑末端(ブラント・エンド)あるいは付着末端(スティッキー・エンド)を持つDNA鎖同士を結合します。
特長
■T4 DNAリガーゼ
- ニックの入った2本鎖DNAや2本鎖DNA末端の5'-リン酸と3'-OHの間の共有結合の形成を触媒する。
- 制限酵素消化によって生じた突出または平滑末端のDNA断片を連結するのに非常に有用
- 低効率ではありますが、RNAとDNAを、もしくは2本鎖のRNAを連結することも可能
- 大腸菌でクローン化して発現させ、均一に精製されている。
- エンドヌクレアーゼ、エキソヌクレアーゼ、ホスファターゼを含まない。
1本鎖のDNAやRNAは、T4 DNAリガーゼでライゲーションすることはできません。
<応用例>
- プラスミドベクターへのサブクローニング
- 突出末端を持つDNAや平滑末端を持つDNAへのリンカーやアダプターDNAの付加
■DNAライゲーション キット
- 室温で5分以内にDNA断片を素早くライゲーションすることが可能
- T4 DNAリガーゼと2X Kickspeed DNA Ligation bufferが含まれている。
- ホスホジエステル結合の形成を触媒し、2本のDNA鎖を結合する。
- T4リガーゼは、平滑末端あるいは突出末端をもつ2本鎖DNAに作用
- 効率的なライゲーションのための最適なバッファーを提供
<応用例>
- 一般的なクローニング
- ブラントエンドクローニング
- TAクローニング
- ライブラリー構築
- リンカーライゲーション
■2X DNAライゲーションミックス
- 平滑末端と突出末端の両方の連結反応に使用できるT4 DNAリガーゼが入ったready-to-useタイプの溶液
- このマスターミックスは、室温での短いインキュベーション時間(<5分)で迅速なライゲーションを可能にする。
<応用例>
- ベクター構築
- リンカーライゲーション
- フラグメントアセンブリー
- ルーティンクローニング