ライトサイクラー480用 プローブマスター
LightCycler® 480 Probe Master
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よくあるご質問1件
LightCycler® 480 インスツルメント上のマルチウェルプレートでの加水分解プローブ検出フォーマット用に特に開発されたレディー・ツー・ユースの反応ミックス
特長
- LightCycler® 480用qPCR Probe Master Mix(2x)
- 適切なプローブ(加水分解プローブ、ユニバーサルプローブライブラリーなど)、遺伝子特異的プライマーとの組み合わせで、LightCycler® 480 を使用したリアルタイムPCR用にデザインされたキット
- 遺伝子の定量のためのホットスタートPCRアッセイに最適
- 簡便な2倍濃度のホットスタートマスターミックスのため時間が節約可能
- ピペッティングステップと汚染の危険性を最小限に。
- LightCycler® 480 インスツルメントを使用して特異的、高感度の定量PCRやRT-PCRを実行
- 時間のかかるMgCl2の滴定は必要なし
- LightCycler® 480 インスツルメントとマルチウェルプレートにより、一定で高品質の性能を達成
- LightCycler® 480プローブマスターとユニバーサルプローブライブラリーとの組み合わせで、新規のqPCRアッセイの確立と迅速な結果が得られる。
製品の記述
LightCycler® 480プローブマスターは、LightCycler® 480 インスツルメント上のマルチウェルプレートでの加水分解プローブ検出フォーマット用に特に開発されたレディー・ツー・ユースの反応ミックスです。
これは非特異的増幅産物の形成を最小限にすることでPCRの感度と特異性を顕著に改善するホットスタート用の、ファストスタートTaq DNAポリメラーゼを含んでいます。
背景
加水分解プローブアッセイは、2種類の標識物;蛍光レポーターダイとクエンチャーを含む単一のプローブを使用します。
プローブが完全なとき、クエンチャーはレポーターダイに近接し、蛍光共鳴エネルギー転移(FRET)によりレポーターの蛍光を抑制しています。
プローブがターゲットのシークェンスにハイブリダイズしたとき、ポリメラーゼの5'-ヌクレアーゼ活性が加水分解プローブを分解し、レポーターとクエンチャーを分離します。
PCR間にターゲットシークェンスが増加し、より多くのプローブが分解され、クエンチングされていないレポーターダイの蛍光シグナルが増加します。
2倍濃縮マスターミックスは、固定されたMgCl2濃度に至適化され、ほとんどすべてのプライマーの組み合わせで作動します。
様々なシーケンスを増幅するためのMgCl2濃度の調整は必要ありません。テンプレートDNA、PCRプライマー、加水分解プローブを加えるだけです。
品質
機能試験:LightCycler® 480 インスツルメントで機能試験済みです。
本キットは、加水分解プローブ(ユニバーサルプローブライブラリー)での使用に特に至適化されています。
FRET(ハイブリダイゼーションプローブ)、モレキュラービーコン、スコーピオンなどのLightCycler®480 インスツルメントで使用される他のプローブフォーマットも適用できます。
本キットは、PCR間のキャリーオーバーを防ぐために、熱不安定性ウラシルDNAグリコシラーゼと組み合わせて使用できます。
キット内容
構成品 | 容量(5×1 mL) | 容量(10×5 mL) | 容量(1×50 mL) |
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LightCycler® 480 Probe Master,2×conc. | 5×1 mL | 10×5 mL | 1×50 mL |
水,PCRグレード | 5×1 mL | 2×25 mL | 2×25 mL |