FastGene™ スクリプテース II

特長

• 逆転写酵素＆cDNA合成キット
• 少量のRNAからcDNAを合成することが可能
• MuLV逆転写酵素のRNaseHドメインに変異が導入されているため、1st strand cDNA合成中にRNAの分解は起きず全長cDNAをより高い収量で得ることが可能
• 12 kbpまでのフラグメントサイズを得ることが可能
• 酵素自体のRobust性が上がり、熱安定性が向上
• qPCRやNGS等のダウンストリームアプリケーションに最適
• 得られた全長cDNAにより、遺伝子の全体像やスプライシングバリアントのような修飾を確認することが可能

  

図1. cDNAを鋳型としマルチプレックスPCRを行った結果
　　(逆転写酵素：FastGene™ Scriptase IIと他社RT-II酵素　逆転写温度：42 ℃、50 ℃)

 

 

図2. 様々な濃度のRNAを用いて作成されたcDNAとGAPDHプライマーを用いてqPCRを行ったCt値の結果
　　(逆転写酵素：FastGene™ Scriptase II と他社RT-II酵素　逆転写温度：42 ℃)

 

 

図3. 様々な濃度のRNAを用いて作成されたcDNAとYWHAZプライマーを用いてqPCRを行ったCt値の結果
　　(逆転写酵素：FastGene™ Scriptase IIと他社RT-II酵素　逆転写温度：42 ℃)

 

アプリケーション

• 遺伝子発現の定量化
• RT-qPCR
• 次世代シーケンシング
• 低濃度RNA
• 困難なテンプレート

キット内容

NE-LS53 (逆転写酵素)

• FastGene™ Scriptase II（200 U/μL）/チューブ1本
• 5 × FastGene™ RT Buffer /チューブ1本
• DTT (0.1 M) /チューブ1本
• dNTP Mixture（2 mM each）/チューブ1本
• Sterile water（RNase free）/チューブ2本

NE-LS63 （逆転写酵素＆cDNA合成キット）

• FastGene™ Scriptase II (200 U/μL) /チューブ1本
• 5x FastGene™ RT buffer /チューブ1本
• DTT (0.1 M) /チューブ1本
• dNTP Mixture (2 mM each) /チューブ1本
• Sterile water (RNase free) /チューブ2本
• RNase Inhibitor (40 U/μL) /チューブ1本
• Oligo dT Primer (80 μM) /チューブ2本
• Random hexamer (100 μM) /チューブ2本 

NE-LS64(マスターミックスタイプ/ランダムヘキサマー入り)

• 5x FastGene™ Scriptase II ReadyMix (LS64) /チューブ1本
  【含有成分】
  ・FastGene™ Scriptase II 逆転写酵素
  ・FastGene™ Scriptase II 反応バッファー
  ・dNTPミックス
  ・RNaseインヒビター
  ・ランダムヘキサマー
  ・補助タンパク質

 

NE-LS65（マスターミックスタイプ/ランダムヘキサマー＋オリゴdTプライマー入り）

• 5x FastGene™ Scriptase II ReadyMix (LS65) /チューブ1本
  【含有成分】
  ・FastGene™ Scriptase II 逆転写酵素
  ・FastGene™ Scriptase II 反応バッファー
  ・dNTPミックス
  ・RNaseインヒビター
  ・ランダムヘキサマー
  ・オリゴdTプライマー
  ・補助タンパク質

関連製品

• FastGene™ Scriptase Basic