FastGene™ RNA Premium Kit 250回用

扱いが簡単でした。
(FastGene™ RNA Premium Kit のトライアル品をお試しいただいたお客様です。）

Kitの使い方が詳しく案内されており、応用しやすかった。
カラムを他のキットと別に低温保管することが面倒に感じた。数人で共有するキットになるので管理の手間から、低温でも常温でもいいので一緒に置きたい。
(FastGene™ RNA Premium Kit のトライアル品をお試しいただいたお客様です。）

他社の製品と比較のため同時に抽出を行いましたが、同等の収量および質を確保することができました。

葉の発生の研究にあたって、様々なサイズの組織からRNAを抽出することがよくあります。
FastGene™ RNA Premium kit は、比較的多量の組織からごく少量の組織まで、単一のキットでカバーできる点や、少量の場合は最終溶出の容量を10μLまで減らせる点が使いやすく感じています。
また植物はイントロン配列が短いことからゲノムDNAのコンタミが問題になりやすいですが、本キットでは溶液中でDNase反応を行なうことで効果的にDNAの除去ができていると感じました。
逆転写酵素についても、長い配列をもつ遺伝子でもしっかりと逆転写できており、クローニング等の実験においては十分な品質であると感じました。
いずれも使用感や品質はこれまで使っていたキットと遜色がないですが、低価格なためとても使いやすいキットです。

FastGene RNA精製トライアルキットにより抽出したRNAを用いたqPCR実験およびddPCR実験を行いました。
結果はこれまでのものと遜色なく、全く問題ない（むしろ良い）、との結論に至りました。
抽出したRNAの精製度が、これまでの手法で得られたものより非常に高かった点にも満足しております。本来、NALCNチャネルは in vivo 脳組織内での検出が非常に困難なタンパクです。
そこで、タグ配列を付加したNALCNタンパクを発現する脳組織に対し、タグ抗体を用いてより高精度にNALCNを検出することを目的とし、CRISPRで遺伝子改変マウスを作成しました。
その結果、脳組織ライセートを用いたウエスタンブロットにて非常に特異性の高いシグナルを確認することができました。
今回のPCR実験結果より、野生型との比較でmRNA発現量には変化がないということが示され、NALCNタンパクそのものの発現量にもおそらく影響がないだろうことが期待されます。
今後は、タグ付加型タンパクを発現する遺伝子改変マウスを用いて、NALCNチャネルの分子特性についてより詳細に解析したいと考えています。

今回、マウスの培養細胞から細胞分裂に関わる遺伝子 A (約 3,500 bp) を単離する目的で本キットを使用しました。
評価のため Q 社のキットと比較したところ、同等の収量と純度で トータル RNA を精製することができました。
得られた RNA から cDNA を合成し、PCR により遺伝子 A の増幅を試みたところ、目的の位置にバンドが検出さ
れました。
この断片を精製し、制限酵素を用いてベクターに挿入したところ、問題なく遺伝子 A を単離することができました。
また、当研究室では他にも qRT-PCR で Q 社キットを用いた場合と同等の結果が得られております。
本キットは高い収量で純度の高いRNAを安定的に精製できることに加え、比較的安価であることから、RNA 精製
キットに価格と質を求める方には、強くお勧め致します。

以前のRNA抽出方法（フェノール／クロロホルム抽出）では、gDNAのコンタミのため、gDNA由来の産物が増幅されてしまい、困っていました。（遺伝子の構造により、プライマー設計の工夫では回避できない。）
そのため、通常の抽出後に別途DNase処理を行い、もう一度フェノール／クロロホルム抽出と濃度測定をしてから逆転写を実施していました。
この方法では、手間と時間がかかっていたのですが、本キットではそれを大幅に低減することができ、非常に助かりました。
融解曲線の解析（結果2-②）でも、gDNA由来の産物は確認されず、結果に大変満足しています。
また、一つのキットの中にホモジナイズ、精製、DNase処理がすべて含まれていて、なおかつ安価なのでありがたいです。
Lysisバッファーや、DNaseの量にもう少し余剰があると安心です

時に多量のサンプルからRNAを抽出しなければならない時がありますが、このキットだと操作が30分程度で終了し、値段も安価。
収量もまったく問題ない量とれるので、重宝しています。純度・濃度ともに問題なく抽出できている事からも御社のRNA抽出キットの良さを様々な面で感じました。

RNAの発現定量解析を行っていますが、「qPCRプライマーの設計ではゲノムDNAの検出を回避する手法が使えない」実験を行っているため、精製したRNAへのDNAのコンタミを極力抑えることのできる抽出キットを探していました。
FastGene™ RNA Premium Kit を用いて精製したRNAではDNAのコンタミに由来するシグナルがほとんど検出されず、他社製品を用いてRNAを精製した場合に比べ発現RNA量をより正確に定量することができました。
ジャンクションを挟んだプライマー設計ができない場合などDNAの混入を極力抑える必要のある実験において強い威力を発揮する製品です。

フェノールとチオシアン酸グアニジンを用いた方法に比べ、簡便に高純度なRNAが十分量精製できます。