ＬＣ　ＴａｑＭａｎ　Ｍａｓｔｅｒ

LightCycler 2.0 (DX400)用　QPCR Probe Kitです

背　景

本キットは，LightCycler^® 2.0 システムを使用し，ガラスキャピラリー内でTaqMan^®(加水分解プローブ)検出フォーマットを行うためにデザインされた，ready-to-useの反応ミックスです．これは，ホットスタートPCRのためにファストスタートTaq DNAポリメラーゼを含み，非特異的な増幅産物の形成を最小限にすることにより，PCRの特異性と感度を顕著に改善します．

TaqMan^®アッセイとも呼ばれる加水分解プローブアッセイは，2種類の標識物；蛍光レポーターダイとクエンチャーを含む単一のプローブを使用します．プローブが完全なとき，クエンチャーはレポーターダイに近接し，蛍光共鳴エネルギー転移(FRET)によりレポーターの蛍光を抑制しています．プローブがターゲットのシークェンスにハイブリダイズしたとき，ポリメラーゼの5'-ヌクレアーゼ活性が加水分解プローブを分解し，レポーターとクエンチャーを分離します．PCR間にターゲットシークェンスが増加し，より多くのプローブが分解され，クエンチングされていないレポーターダイの蛍光シグナルが増加します．

ライトサイクラーTaqMan^®マスターは，簡便で，優れた性能，良好な再現性を提供します．5倍濃縮マスターミックスは，固定されたMgCl₂濃度に至適化され，ほとんどすべてのプライマーの組み合わせで作動します．様々なシークェンスを増幅するためのMgCl₂濃度の調整は必要ありません；テンプレートDNA，PCRプライマー，加水分解プローブを加えるだけです．

利点

• 簡便で，ready-to-useの5倍濃縮ホットスタートマスターミックスで時間を短縮
• ライトサイクラー2.0 インスツルメントとTaqMan^®(加水分解)プローブを使用しての高感度で定量的なPCRの実行
• 時間のかかるMgCl₂滴定の排除
• ライトサイクラー2.0 インスツルメントによる均質な高品質性能を達成

アプリケーション

本キットは，適切なPCRプライマーと加水分解プローブを組み合わせ，ライトサイクラー2.0 インスツルメントを使用した定量PCRや2ステップRTPCRのためにデザインされています．本キットは，PCR間のキャリーオーバーを防ぐために，熱不安定性ウラシルDNAグリコシラーゼと組み合わせて使用できます．

注記：TaqMan^®アッセイはPCR間のプローブの分解に基づいています：それゆえ，加水分解プローブは融解曲線分析には使用できません．

品　質

機能試験：ライトサイクラー2.0 インスツルメントで機能試験済みです．

保管温度冷凍 (-20℃)
毒劇なし

内　容

1. ライトサイクラーファストスタート酵素
2. ライトサイクラーファストスタートTaqMan^®反応ミックス
3. 水，PCRグレード，2×1 ml