Cat.No 包装単位 価格（税込み） NucleoSpin® RNA Virus Kit 740956-10 10 ￥10,000 （￥10,500） 10 NucleoSpin® columns, 40 collecting tubes 2 ml, buffers RAV1, RAV3, RAW, RE, RNase-free water; carrier RNA 740956-50 50 ￥39,000 （￥40,950） 50 NucleoSpin® columns, 200 collecting tubes 2 ml, buffers RAV1, RAV3,RAW, RE, RNase-free water; carrier RNA 740956-250 250 ￥200,000 （￥210,000） 250 NucleoSpin® columns, 1000 collecting tubes 2 ml, buffers RAV1, RAV3, RAW, RE, RNase-free water; carrier RNA 2007年10月1日価格改訂

	● 150μlの血清、血漿、生物学的液体（細胞を含まない）の処理が可能です。 ● 独自の2段階洗浄法であらゆる夾雑物を除去できます。 ● ウィルスRNAとDNA（改良プロトコル）の両方を並行して精製する場合に最適です。      例えば、HBV DNAの精製では、Proteinase K消化が必要です      （注意：Proteinase Kは本キットに含まれません）。      ウィルスDNAの精製を最も高純度で行ないたい場合には、NucleoSpinｨ Blood Kitの使用をお勧めします。
	● 150μlの血清、血漿、体液　等	● 精製方法：シリカメンブレン法 ● サンプル量：≦150μl ● 溶出量：50μl ● 結合容量：40μg　DNA／RNA

図A：最初のPCR増幅 1：マーカー（pUC19-MSP I） 2：HCV - 50 000 cp/ml 3：HCV - 5 000 cp/ml 4：HCV - 2 500 cp/ml 5：HCV - 1 250 cp/ml 6：HCV - 500 cp/ml 7：HCV - 250 cp/ml 8：ネガティブコントロール 9：マーカー（pUC19-MSP I） 10：ポジティブコントロール 図B：nested PCR増幅 1：マーカー (pUC19-MSP I) 2：HCV - 5 000 cp/ml 3：HCV - 500 cp/ml 4：HCV - 250 cp/ml 5：HCV - 125 cp/ml 6：HCV - 62.5 cp/ml 7：HCV - 31.25 cp/ml 8：ネガティブコントロール 9：マーカー (pUC19-MSP I) 10：ポジティブコントロール 図　NucleoSpin® RNA Virus Kitを用いたHCV RNA精製：最初にPCR増幅を行ないnested PCRで確認 HCV陽性の臨床検体をCobas Amplicor HCVアッセイを用いて定量的に検出しました。 この報告では、NucleoSpin® RNA Virus Kitの検出感度を確認するため、陰性の健常血清で複数回の希釈を行なっています。実際には、出発材料の50.000コピーHCV/ml血清サンプルを、理論的には30コピー/mlまで希釈しています。次にNucleoSpin® RNA Virus Kitを用いて希釈サンプルを精製しました。50mlの溶出分画から5μlを分取してPCR増幅 (図A)を行ない、引き続いてnested PCR増幅 (図B)を行ないました。PCR産物の分析にはアガロースゲル電気泳動を使用しました。 最初のPCR反応では1000コピー/ml程度までを検出しましたが、nested PCRではさらに希釈されたサンプルも検出できました。理論的には30〜60コピー/mlでも陽性シグナルが検出できたことになります。本検出システムでは、同時にポジティブコントロールとネガティブコントロールも処理しています。これら結果が示しているのは、NucleoSpin® RNA Virus Kitを用いれば、低タイターサンプルでもウィルスRNAを良好に回収できることや、精製後のRNAが研究に適していることです。 Dr. C. Tiemann, Laboratory Prof. Hagedorn, Herford, Germanyのご厚意により掲載しました。